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    塑料培養(yǎng)皿全解析:細胞培養(yǎng)實驗中的選擇、操作與注意事項

    更新時間:2025-06-19    點擊次數:569

      塑料培養(yǎng)皿全解析:細胞培養(yǎng)實驗中的選擇、操作與注意事項?

      以下是塑料培養(yǎng)皿的正確使用方法指南,綜合實驗室操作規(guī)范與注意事項:

      一、使用前準備?

      規(guī)格選擇?

      35mm?:適合小規(guī)模實驗(如干細胞克隆),培養(yǎng)基用量2-3ml。

      60mm?:通用型,培養(yǎng)基4-5ml,適用于常規(guī)細胞傳代。

      100mm/150mm?:需大量擴增細胞時使用,培養(yǎng)基8-10ml,注意開口大易污染。

      拆封與檢查?

      一次性塑料培養(yǎng)皿通常預滅菌(γ射線或EO),拆封前確認包裝完好。

      檢查表面是否平整無裂紋,避免影響細胞貼附。

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      二、操作步驟?

      無菌操作?

      超凈臺內酒精擦拭臺面及手套,避免手部接觸皿內壁。

      開蓋時短暫灼燒皿口(若使用酒精燈),減少空氣污染。

      培養(yǎng)基與細胞接種?

      貼壁細胞:接種密度建議5×10?~1×10? cells/cm2,搖勻時采用“十字法"混勻。

      懸浮細胞:選擇低吸附處理培養(yǎng)皿,減少細胞損失。

      培養(yǎng)環(huán)境控制?

      CO?培養(yǎng)箱中倒置皿蓋,防止冷凝水滴落干擾細胞生長。

      保持水平放置,避免培養(yǎng)基分布不均。

      三、使用后處理?

      廢棄規(guī)范?

      接觸生物樣本的培養(yǎng)皿需按生物廢物處理,不可隨意丟棄。

      未污染的塑料皿可高溫高壓滅菌(需確認材質耐溫性)后丟棄。

      重復使用(僅限可滅菌型)?

      耐高溫PP材質可121℃高壓滅菌15分鐘。

      普通PS材質建議化學消毒(如75%酒精浸泡30分鐘)。

      四、常見問題解決?

      細胞貼附差?:檢查是否誤用未TC處理的培養(yǎng)皿,或包被步驟失效。

      邊緣干涸?:培養(yǎng)箱濕度不足時,可在周圍放置無菌水盤。

      污染跡象?:立即終止實驗,并對操作環(huán)境消毒。

      五、注意事項?

      避免高溫變形?:PS材質培養(yǎng)皿不可高壓滅菌或高溫烘干。

      觀察記錄?:選擇高透明度培養(yǎng)皿,便于直接顯微鏡觀察。

      分裝保存?:未使用的皿條需密封防潮,避免長時間暴露。

      如需特定滅菌參數或細胞類型適配建議,請參考產品說明書。

      注:以上資料僅供參考,如需特定品牌或滅菌參數,請參考產品說明書或是咨詢供應品牌商。

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